TÉCNICAS DE INMUNODIAGNOSTICO

17.12.19 OBJETIVO Separar las proteínas contenidas en un suero e identificar en él la posible presencia de albúmina e IgG FUNDAMENTO La inmunoelectroforesis es una técnica de separación e identificación de sustancias (habitualmente proteinas) que atraviesan dos fases. Durante la primera fase, separamos las proteínas de la muestra mediante una electroforesis convencional en agarosa. En la segunda fase, se practica un carril o canal paralelo a recorrido electroforetico y se rellena con un Ac antiproteina adecuado. La difusión del Ag y del Ac permitirá que ambos se unan y reaccionen entre sí formando un complejo Ag-Ac que se hará visible en forma de unos arcos de precipitación. Material necesario: Cubeta de electroforesis y fuente de alimentación. Probeta de 1L y de 250ml Matraz erlenmeyer Embudo Placa de Petri Portaobjetos Pautas para perforar pocillos Reactivos: A: IgG B: Suero saguineo C: Albúmina D: Acs frente al suero E: Ac frente a la IgG F: polvo de...

10.12.19 OBJETIVO Introducir los principios de las interacciones Ag-Ac usando el procedimiento Ouchterlony. FUNDAMENTO La doble difusión en dos dimensiones es un procedimiento simple inventado por Orjan Ouchterlony. Las soluciones de Ag y Ac se colocan en pocillos separados cortados en una placa de agarosa. Los reactivos se difunden desde los pozos uno hacia el otro y precipitan donde se encuentran en proporciones equivalentes. Un único Ag se combinará con su Ac homólogo para formar una única línea de precipitación. Cuando dos Ags están presentes, cada uno se comporta independientemente el uno del otro. Por lo que el número de bandas de precipitación indica que hay al menos muchos pares de Acs y Ags presentes. Material necesario: Micropipeta y puntas Placas de Petri Baño termostático Microondas Probeta Vaso de precipitados Pipeta pasteur Gradilla  Tubos eppendorf Reactivos: Antisuero (Ac) Suero total (Ag) Albúmina (Ag) IgG (Ag) Agarosa PROCE...

27.11.19 OBJETIVO El objetivo va a ser determinar la presencia de ASLO a través de una inhibición de la hemaglutinación. FUNDAMENTO La SLO iofilizada es un purificado de estrep. ꞵ hemolíticos. Es un producto estandarizado para la determinación cuantitativa del título de ASLO.  Diluciones crecientes del suero problema se enfrenta con una cantidad constante de SLO. en presencia de hematíes O (ya que están libres de Ag). Nosotros realizamos el micrométodo. Material necesario: Placa microtiter Micropipetas y puntas Pipeta Eppendorfs Tubos de ensayo Gradilla Reactivos: Tampón fosfato isotónico, pH=6 Suero.  Hematíes O.  SLO PROCEDIMIENTO Nuestro grupo se encargó de realizar alicuotas para toda la clase en tubos eppendorfs. Además tuvimos que rehidratar la SLO con 15 mL de agua, para ello me serví de una pipeta eché el agua destilada, homogeneizando y luego agitando suavemente. También realizamos la dilución del paciente con las posterio...