PRÁCTICA 9: ANTÍGENOS BACTERIANOS. DETECCIÓN DE AC FEBRILES

29.10.19

OBJETIVO:

El objetivo es la determinación semicuantitativa de Ac febriles por la demostración del título de Ac específicos, somáticos o flagelares en el suero del paciente

FUNDAMENTO:

Los Ag bacterianos son una técnica de aglutinación en porta y tubo para la detección y semicuantificación de Ac anti- Salmonella, Brucella y Proteus en suero humano. Los reactivos aglutinan en presencia del Ac homólogo correspondiente en las muestras ensayadas. Forma las bases del ensayo de Widal que establece que altos niveles de Ac O y H superiores a 1/100 en suero, es indicativo de infección por estos microorganismos.

Material necesario:
  • Gradilla
  • Tubos de ensayo
  • Micropipeta y puntas.
  • Estufa a 37ºC
Reactivos:
  • Brucella abortus
  • Control +
  • Control -
PROCEDIMIENTO:

Método semicuantitativo

Realizamos directamente el método semicuantitativo en el cual primero rotulamos los tubos con la dilución que llevarán.
Seguidamente cogemos una micropipeta y dispensamos en los 6 tubos 1 mL de solución salina y luego 0,9 mL de solución salina solo en el primero. Tras ello depositamos 100 µL de muestra en el primero y realizamos una batería de dilución con 1 mL de volumen de paso y desechar el ultimo volumen de paso. Tras ello echamos una gota de Ag a cada tubo y le damos un ligero toque para que se homogeneice.
Luego lo tapamos con tapones y lo introducimos en la estufa donde lo dejamos 24 horas.







30.10.19

Al día siguiente observemos los tubos y vimos que aglutinó solo en el primero por lo que el título es 20 porque la dilución es 1/20.




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