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Mostrando entradas de octubre, 2019

PRÁCTICA 9: ANTÍGENOS BACTERIANOS. DETECCIÓN DE AC FEBRILES

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29.10.19 OBJETIVO: El objetivo es la determinación semicuantitativa de Ac febriles por la demostración del título de Ac específicos, somáticos o flagelares en el suero del paciente FUNDAMENTO: Los Ag bacterianos son una técnica de aglutinación en porta y tubo para la detección y semicuantificación de Ac anti- Salmonella, Brucella y Proteus en suero humano. Los reactivos aglutinan en presencia del Ac homólogo correspondiente en las muestras ensayadas. Forma las bases del ensayo de Widal que establece que altos niveles de Ac O y H superiores a 1/100 en suero, es indicativo de infección por estos microorganismos. Material necesario: Gradilla Tubos de ensayo Micropipeta y puntas. Estufa a 37ºC Reactivos: Brucella abortus Control + Control - PROCEDIMIENTO: Método semicuantitativo Realizamos directamente el método semicuantitativo en el cual primero rotulamos los tubos con la dilución que llevarán. Seguidamente cogemos una micropipeta y dispensamos en los 6...

DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE AC ANTI-TREPONEMA TPHA

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29.10.19 OBJETIVO : Es la detección cualitativa y semicuantiva indirecta en microplaca de Ac especificos anti-Treponema pallidum. FUNDAMENTO: La sífilis es una enfermedad venerea provocada por la infección con T. pallidum. La transmisión de produce por contacto directo a traves de una lesión productiva. Los Ac anti-Treponema aparecen a partir de la primera fase y pueden permanecer en un 85-90% de pacientes tratados a pesar de haber superado la enfermedad. Material necesario: Micropipeta y puntas Placa de microtiter Reactivos R1: Células Test (TC): Hematíes de ave estabilizados y sensibilizados con Ag de T.pallidum R2: Células Control (CC): Suspensión estabilizada de hematíes de ave R3: Diluyente: Tampón fosfato PROCEDIMIENTO Método cualitativo: Lo que hicimos fue poner en la primera fila de placa microtiter  la Muestra en el primer pocillo, y en el segundo el control muestra. Para ello realizamos lo siguiente: _ En el pocillo de muestra ponemos 2...

RPR-carbon. Determinación cualitativa de reaginas plasmáticas.

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22.10.19 OBJETIVO Determinar cualitativamente la presencia de reaginas plasmáticas en suero humano, ya que se utilizan partículas de carbón sensibilizadas con una mezcla de lípidos y son aglutinadas si hay presencia de reaginas en la muestra del paciente que estuviese afectado por sífilis. FUNDAMENTO Es una técnica no treponémica de aglutinación para la detección cualitativa y semicuantitativa de reaginas plasmáticas presentes en suero humano. Las reaginas son grupo de anticuerpos dirigidos contra componentes del propio organismo, originadas en pacientes que sufren infección por Treponema pallidum, agente causal de las sífilis. Este microorganismo produce lesiones en el hígado y corazón, liberando al torrente circulatorio pequeños fragmentos de este órgano. Material necesario: Micropipeta y puntas Vaso para desechos Tarjeta REACTIVOS: R1 (PRP) Carbón: partículas de carbón sensibilizadas con una mezcla de lípidos y colesterol. Control +: Suero artificial con un títul...

PRÁCTICA 6: ROSA DE BENGALA

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OBJETIVO El Rosa de Bengala es una técnica de aglutinación en porta para la detección cualitativa y semicuantitativa de Ac anti-Brucela en suero humano. La suspensión bacteriana y coloreada, es aglutinada por Ac IgG o IgM presentes en el suero del paciente. FUNDAMENTO El diagnostico de la brucelosis puede establecerse bien sea por el aislamiento del microorganismo en sangre o heces, o por la demostración de la presencia de Ac específicos en el suero del paciente, que es el que vamos a hacer en este caso. El reactivo, debido a su formulación en un tampón ácido, es capaz de reaccionar con IgG o IgM, por lo que es muy útil para el diagnostico de individuos en fase crónica de la enfermedad, los cuales presentan un nivel elevado de IgG difícilmente detectables por el método tradicional de aglutinación en tubo (Wright) Es decir, sirve de screening. REACTIVOS Rosa de Bengala: suspensión de Brucella abortus cepa S99, en tampón lactato Control + (rojo): Suero animal, con Ac anti Bru...

PRÁCTICA 5: DETERMINACIÓN CUALITATIVA Y SEMICUANTITATIVA DE ANTI- ESTREPTOLISINA O (ASO)

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OBJETIVO De nuevo por esta práctica íbamos a reforzar nuestros conocimientos de inmunidad y aglutinación, dado que dicha técnica se usa también en tarjeta o porta y se usa con partículas de látex recubiertas de estreptolisina O humano en suero humano, en caso de que el suero contenga Ac ASO aglutinarán con las partículas de látex FUNDAMENTO La estreptolisina O es una exoenzima inumnogénica tóxica producida por el estreptococos 𝛃-hemolíticos de los grupos A, C y G. La cuantificación de Ac ASO se utiliza para el diagnóstico y tratamiento de enfermedades como fiebres reumáticas, glomerulonefritis aguda... Dichas fiebres es una enfermedad inflamatoria que afecta al tejido conectivo de diversas zonas y la glomerulonefritis es una inflamación del riñón que afecta a los glomérulos renales. Reactivos: Látex: suspensión de partículas de látex cubiertas con SLO, pH 8,2 Control + (rojo): Suero humano con concentración de ASO >200 UI/mL Control - (azul): Suero animal Es importante...

PRÁCTICA 4: Serodiagnostico de la toxoplasmosis por hemoaglutinacion indirecta

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15.10.19 OBJETIVO Con esta práctica vamos a determinar tanto cualitativa como semicuantitativo de anticuerpos séricos dirigidos contra toxoplasma gondii por hemoaglutinación indirecta. FUNDAMENTO Los hematíes sensibilizados están constituidos por hematíes de ovino recubiertos por un antígeno toxoplasmatico. Nos permite detectar IgG y IgM antitoxoplasmaticas. La presencia de anticuerpos anti-toxoplasma gondii séricos provoca aglutinación de los hematíes sensibilizados que se traduce en un velo rojo/marrón rojo. En ausencia de Ac específicos , estos hematíes sedimentan en el fondo del pocillo formando un anillo. Los hematíes no sensibilizados aseguran la especificidad de la reacción y permiten eliminar las interferencias debidas a las aglutininas naturales anti-ovino (heteroanticuerpos de Forssman, Ac de mononucleosis infecciosa) Composición del equipo Hematíes sensibilizados (origen animal) Hematíes no sensibilizados (origen animal) Tampón fosfato pH 7,2 ...